大黄素激活AMPK/SREBP-1通路减少脂肪酸诱导的HepG2细胞脂肪变性

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目的

研究大黄素对游离脂肪酸(FFAs)诱导的人源肝癌细胞HepG2细胞脂质蓄积的脂质调节和氧化应激作用及其可能的相关机制。

方法

以噻唑蓝(MTT)法测定大黄素对HepG2细胞存活率的影响;采用1 mmol /L FFAs(油酸∶棕榈酸=2∶1)诱导HepG2细胞脂肪变性,将HepG2细胞分为5组:正常对照组、模型组、大黄素低剂量组、大黄素中剂量组、大黄素高剂量组。采用油红O染色及甘油三酯含量测定评价大黄素对肝细胞脂肪变性程度的影响。流式细胞术检测各组细胞脂质蓄积引起的活性氧(ROS)的变化;Western blot检测各组细胞单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)、磷酸化AMPK (p-AMPK)、固醇调节元件蛋白1 (SREBP-1)的表达变化。

结果

1 mmol/L FFAs处理后的HepG2细胞24 h后出现大量脂滴,TG含量明显增加(P<0.05)。与模型组相比,大黄素组的脂滴减少,甘油三酯蓄积下降(P<0.05),并呈剂量依赖性;还可以降低脂肪酸氧化后的ROS水平(P<0.01)。另外,大黄素处理后增加AMPK与p-AMPK的表达水平(P<0.01),下调SREBP-1的表达水平(P<0.01)。

结论

大黄素可抑制FFAs诱导的HepG2细胞脂肪蓄积,减轻氧化应激损伤,其作用可能与激活AMPK/SREBP-1通路有关。

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